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間接法ELISA不能直接用酶標(biāo)記的原因
更新時(shí)間:2017-03-03   點(diǎn)擊次數(shù):1228次

ELISA試劑盒SCI文章在ELISA實(shí)驗(yàn)中,用間接法測(cè)定抗體,不能直接將待測(cè)抗體直接用酶標(biāo)記,然后直接加底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢?
如果將酶標(biāo)記到待測(cè)抗體上,相對(duì)經(jīng)典的間接法更加繁瑣,而且您在摸索標(biāo)記條件時(shí)不能保證操作失誤導(dǎo)致待測(cè)抗體失活;酶標(biāo)二抗現(xiàn)在是已經(jīng)商品化了的,被大規(guī)模,購買后使用方便。如果你的間接做的好的話,方法被優(yōu)化了后,一抗二抗顯色,總共的時(shí)間加起來,出結(jié)果不會(huì)超過2-3小時(shí)。
可以用直接ELISA法,就是用抗體包板,在抗原上標(biāo)記酶,然后顯色,這樣與間接法相比就減少了一步,縮短了時(shí)間。
但是,直接法和間接法,他們各有優(yōu)缺點(diǎn),ELISA試劑盒SCI文章需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求而定。
1.待測(cè)抗體一般是免疫后產(chǎn)生的抗體,其中有免疫失敗和抗體過少等因素存在,用酶標(biāo)記有許多不確定性,如用酶標(biāo)記前期有測(cè)不出效價(jià)的可能,造成不必要的困惑。
2.ELISA酶聯(lián)免疫中酶標(biāo)抗抗體和抗體結(jié)合后有巨大的信號(hào)放大作用,可以將信號(hào)擴(kuò)大千倍以上,適合于較低抗體量的測(cè)定。
3.ELISA試劑盒SCI文章篩出單抗后可以考慮直接酶標(biāo)抗體,不過在確定測(cè)定體系上要費(fèi)不少功夫。

 

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